Menentukan Bakteri Staphylococcus dan Streptococcus

Menentukan Bakteri Staphylococcus dan Streptococcus

Hari Pertama

• Dibuka tutup tabung TSB dengan mulut tabung di fiksasi dengan api bunsen
• Ditanamkan sampel dengan cara mengoleskan kapas ke dinding tabung dekat cairan TSB
• Difiksasi mulut tabung dengan api bunsen dan  ditutp kembali dengan kapas penutup
• Diletakkan dalam Inkubator pada suhu 37'C selama 18 - 24 jam

Hari Kedua 

Hasil Pengamatan : (+) Keruh

• Diamati cairan TSB apabila keruh maka terdapat bakteri
• kenudian cairan TSB (+) tersebut dibagi menjadi 2 bagian , tabung pertama untuk penanaman dan tabung kedua untuk Mikroskopis dan Uji Katalase

Tabung Kedua :

Mikroskopis

• Diambil sampel dari cairan TSB (+) keruh tersebut, kemudian di buat sediaan tunggu sampai kering dan di fiksasi di atas api bunsen
• Diwarnai dengan larutan Gentian Violet selama 1 - 3 menit, lalu cuci
• Digenangi dengan larutan Lugol selama 1 menit, lalu cuci
• Digenangi dengan Aceton Alcohol selama 30 detik, lalu cuci
• Diwarnai dengan larutan Safranin selama 1 menit, lalu cuci dan keringkan
• Dilihat di bawah mikroskop dengan perbesaran 100x dan ditambahkan oil emersi untuk memperjelas
• Hasil : dilaporkan Bentuk....Susunan....dan Sifat....(gram (+) / gram (-))

Uji Katalase

• Ditabung yang kedua tadi yang berisi cairan TSB (+) keruh di teteskan larutan H2O2 30%
• Dilihat , HASIL : Jika terjadi reaksi Buih pada cairan TSB tersebut maka (+) pemeriksaan mengarah ke skematis pemeriksaan bakteri Staphylococcus dan Jika tidak terjadi reaksi / tidak berbuih berarti (-)  pemeriksaan mengarah ke skematis pemeriksaan bakteri Streptococcus

Lihat Skemamatis Pemeriksaan Bakteri

Tabung Pertama :

Media AD / Agar Darah

• Cairan pada TSB (+) keruh tersebut di ambil dengan menggunakan ose
• Di isolasi pada media Agar Darah 
• Di inkubasi selama 18 - 24 jam dengan suhu 37'C
• Hasil : Bentuk....Warna.....Ukuran.....Elevasi.....Sifat (Hemolisa / Anhemolisa)

Hasil Staphylococcus :

• Staphylococcus aureus (Kuning Emas , Hemolisa Sempurna)
• Staphylococcus albus (Putih , Tidak Menghemolisa)
• Staphylococcus alfa (Kuning jernih , Menghemilisa Sebagian)

Hasil Streptococcus :

• Streptococcus beta (Putih , Hemolisa)
• Streptococcus gamma (Merah , Anhemolisa)
• Streptococcus alfa (hijau , hemoligasti)

Media MSA (Manitol Salt Agar)

• MSA (bakteri yang hanya tumbuh di media MSA hanyalah Staphylococcus , jadi untuk Streptococcus tidak menggunakan Media MSA langsung dari AD ke Subkultur)
• Cairan pada TSB (+) keruh tersebut di ambil dengan menggunakan ose
• Di isolasi pada media MSA
• Di inkubasi selama 18 - 24 jam dengan suhu 37'C
• Hasil : Bentuk....Warna.....Ukuran.....Elevasi.....Sifat (Meragikan / Tidak Meragikan)

Hari Ketiga

Agar Darah Subkultur

• Pada koloni yang terpisah pada media Agar Darah di ambil dengan menggunakan ose 1 koloni
• Ditanamkan pada media Subkultur Agar Darah
• Di inkubasi selama 18 - 24 jam dengan suhu 37'C
• Hasil : Tumbuhnya bakteri / Tidak dan Sifatnya

Hari Keempat

Stretococcus : 

dengan Tes Biokimia

Staphylococcus :

dengan Tes Koagulase

• Tes Koagulase dengan Perbandingan 1 : 1
• Disiapkan alat dan bahan yang di perlukan
• Dibakar ose sampai pijar, diamkan sebentar
• Diteteskan Pada Objek gelas sebelah kiri yaitu NaCl
• Diteteskan Pada Objek gelas sebelah kanan yaitu Plasmacitrat
• Diambil kuman pada media Subkultur AD secukupnya dengan menggunakan ose di homogenkan dengan NaCl tersebut
• Dibakar ose sampai pijar, diamkan sebentar
• Diambil kuman pada media Subkultur AD secukupnya dengan menggunakan ose di homogenkan dengan Plasmacitrat tersebut
• Digoyangkan, lalu lihat terjadi Aglutinasi / Tidaknya
• NaCl adalah sebagai Control
• Hasil : Jika pada Plasmacitrat terjadi aglutinasi / ada butiran - butiran maka di katakan (+)
• Tes koagulase ini adalah untuk menentukan bakteri Patogen / Non Patogen = Jadi jika hasil pada Uji Tes Koagulase (+) maka bakteri itu patogen biasanya dari Spesies Staphylococcus aureus